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液相色譜柱的維護

更新日期: 2012-10-23
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1.2 色譜柱的再生: 長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫ιV柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。建議用來沖洗柱子的溶劑體積色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積 125-4mm        1.6ml       30ml 250-4 mm       3.2ml       60ml 250-10mm       20ml        400ml
選擇再生方法:極性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色譜填料)的再生:正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水 注意:a. 在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由于NH2可能以銨根離子的形式存在,因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液*流出。 b.0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱,如果簡單的用有機溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),在水洗后加用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
3. 色譜柱的維護:
a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)
b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍
c.避免流動相組成及極性的劇烈變化
d.流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。
 

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